Phương pháp xét nghiệm miễn dịch đa kênh cho nghiên cứu Covid-1

PHƯƠNG PHÁP XÉT NGHIỆM MIỄN DỊCH ĐA KÊNH CHO NGHIÊN CỨU COVID-19

Bảng xét nghiệm miễn dịch đa kênh MILLIPLEX® trong ứng dụng nghiên cứu COVID-19
Phát hiện immunoglobulin người kháng lại kháng nguyên SARS-CoV-2

Virus corona SARS-CoV-2 là mầm bệnh gây nên đại dịch COVID-19. Hạt virus có chứa RNA được bao bọc bởi lớp protein nucleocapsid (N) được đóng gói trong một lớp màng protein (M). Các gai protein bao quanh lõi bên trong có chứa tiểu phần S1 và S2, và vùng liên kết thụ thể (RBD) bám vào thụ thể angiotensin converting enzyme 2 (ACE2) của người. Sau khi liên kết, virus sẽ chui vào tế bào, chiếm lấy bộ máy tế bào, sinh sản, và quá trình lây nhiễm virus sẽ được tiếp diễn. Sau khi nhiễm virus, hệ miễn dịch dịch thể phản ứng đầu tiên bằng cách sản xuất immunoglobulin IgM, tiếp theo là IgG, để có thể truyền tải khả năng miễn dịch lâu dài. Kháng thể IgA đáp ứng miễn dịch niêm mạc cũng được tìm thấy trong máu.

Bằng việc xét nghiệm huyết thanh và huyết tương người để tìm kháng thể IgM, IgG, và IgA liên kết với  kháng nguyên SARS-CoV-2, các nhà nghiên cứu có thể xác định những người phơi nhiễm với virus SARS-CoV-2 và gắn kết một số mức độ đáp ứng miễn dịch. Các nhà nghiên cứu có thể hiểu thêm phản ứng miễn dịch trong suốt quá trình nhiễm và phục hồi từ COVID-19.

Những xét nghiệm này đã được sử dụng trong nghiên cứu vaccine để phân bệt giữa các cá thể bị nhiễm COVID-19 tự nhiên và những cá thể đã được tiêm chủng với vaccine mRNA. Các kháng thể kháng N-protein chỉ được phát hiện trên những người nhiễm COVID-19 tự nhiên do vaccine mRNA không chứa trình tự N-protein, và do đó không có kháng thể kháng được sản sinh sau khi tiêm vaccine1.

Thông tin Sản phẩm SARS-CoV-2

Chỉ dùng trong nghiên cứu. Không sử dụng trong Chẩn đoán.

Nghiên cứu Cytokine trong COVID-19

Để đối phó lại sự nhiễm virus SARS-CoV-2 ở phổi, cơn bão cytokine có thể xuất hiện. Các tế bào miễn dịch bị kích thích quá mức và các phân tử tín hiệu của chúng gây nên phản ứng viêm cực bộ trong phổi dẫn đến suy hô hấp và giảm nồng độ oxy trong máu. Một cơn bão cytokine có thể góp phần gây nên triệu chứng lâm sàng nghiêm trọng và tiên lượng xấu cho bệnh nhân.

Các công bố gần đây về hồ sơ cytokine trong COVID-19 đã tìm thấy sự tăng nồng độ của M-CSF, IP-10, IL-1RA, IL-10, IL-15, IL-27, TNF-α, và IL-18 là những dấu hiệu tiên đoán cơn bão cytokine hoặc liên quan tới bệnh trầm trọng hơn 2,3. Trong một nghiên cứu sơ lược, nồng độ của IL-6, IL-8, TNF-α, và IL-10 tuần hoàn được tìm thấy có liên quan đến COVID-19 nghiêm trọng, cùng với IL-18, IP-10, MIG, giữa những cytokine khác4.

Thông tin Sản phẩm Cytokine người

Phương pháp xét nghiệm miễn dịch đa kênh cho nghiên cứu Covid-19 2

Bảng 2. Mã sản phẩm, định dạng, và các chất phân tích trong mỗi kit MILLIPLEX® Human Cytokine/Chemokine/Growth Factor Panel A.

Chỉ dùng trong nghiên cứu. Không sử dụng trong Chẩn đoán.

Thúc đẩy những khám phá nghiên cứu COVID-19 của bạn bằng cách ghép nối định danh cytokine với việc phát hiện immunoglobulin kháng SARS-CoV-2

Sử dụng bộ kit Human Cytokine/Chemokine/Growth Factor Panel A của Merck kết hợp với bảng Kháng nguyên SARS-CoV-2 ở người cho phép các nhà nghiên cứu tạo hồ sơ mẫu huyết thanh và huyết tương với nhiều chất phân tích với lượng thể tích mẫu nhỏ. Những xét nghiệm miễn dịch đa kênh MILLIPLEX® đã được sử dụng cùng nhau trong một vài nghiên cứu gần đây, bao gồm các nghiên cứu đánh giá sự khác nhau của các nhóm tuổi đa dạng với COVID-19 5,6. Một nghiên cứu đã chỉ ra kháng thể IgA và IgG kháng SARS-CoV-2 có mối tương quan nghịch với IL-18, cho thấy đáp ứng miễn dịch niêm mạc ở trẻ em mạnh hơn so với người lớn 5. Một nghiên cứu khác đã chỉ ra mức độ đáp ứng thấp hoặc không phản ứng với kháng nguyên SASR-CoV-2 trong các mẫu dương tính với COVID-19, được gọi là “huyết thanh lặng-serosilent”, có khác biệt đáng kể về nồng độ IL-10, IL-15, IP-10, EGF, và sCD40L, khi so sánh với mẫu huyết thanh phản ứng (seroactive)6. Có nghiên cứu cho thấy rằng các kháng thể kháng S1, S2, và N có mối tương quan nghịch với IL-10 ở những bệnh nhân dương tính COVID-19 phải thở máy, điều này cho thấy vai trò ức chế của cytokine này (Hình 1)7.   Những nghiên cứu này nêu bật tiện ích của việc sử dụng kết hợp xét nghiệm miễn dịch đa kênh cytokine và các immunoglobulin kháng SARS-CoV-2 như một công cụ nghiên cứu mạnh mẽ trong các nghiên cứu về COVID-19.

Hình 1. Kháng thể IgG kháng S1, S2 và N tương quan nghịch với IL-10 ở mẫu huyết thanh/huyết tương của bệnh nhân dương tính COVID-19 phải thở máy, chỉ ra vai trò ức chế của IL-107.

Phân tích Cytokine trên mô hình linh trưởng-không phải người

Nghiên cứu về SARS-CoV-2 đã được thực hiện trên các mô hình động vật, bao gồm khỉ rhesus, cho phép các nhà nghiên cứu thử nghiệm vaccine và thuốc/phương pháp điều trị kháng virus có thể có trên mô hình động vật. Sử dụng bảng MILLIPLEX® Non-Human Primate Cytokine Panel 1 (Cat. No. PRCYTOMAG-40K) để phân tích huyết thanh tại nhiều thời điểm để thấy được sự thay đổi mức độ cytokine và chemokine, một công bố gần đây đã cho thấy sự tăng IL-1RA, IL-6, IL-10, IL-15, MCP-1, MIP-1β, cùng với sự giảm TGFα8.

Miễn dịch tự miễn liên quan tới nhiễm SARS-CoV-2

Các nghiên cứu gần đây chỉ ra rằng việc sản sinh kháng thể tự thân là một đặc điểm của bệnh lý hô hấp nặng, bao gồm COVID-19 cấp tính, và sự hiện diện của chúng nhiều tháng sau khi nhiễm bệnh. Một công bố đã chứng minh sự xuất hiện của các kháng thể tự miễn lên đến bảy tháng sau khi nhiễm bệnh9. Anti-beta 2-glycoprotein, anti-proteinase 3, anti-Mi-2, và anti-PM/Scl-100 liên quan đến sau nhiễm COVID-19, trong khi anti-proteinase 3, anti-Mi-2, anti-Jo-1, và anti-RNP/Sm liên quan tới nhiễm SARS-CoV-2 cấp tính9. Một nghiên cứu gần đây cũng chỉ ra mối liên kết giữa sản xuất kháng thể tự thân, bao gồm các kháng thể tự thân kháng cytokine, gây ra bệnh về hô hấp nghiêm trọng 10.

Thông tin Sản phẩm Kháng thể tự thân

Làm thế nào xét nghiệm miễn dịch đa kênh MILLIPLEX® giúp hiểu thêm về đáp ứng miễn dịch với SARS-CoV-2 ở người

Các xét nghiệm miễn dịch đa kênh MILLIPLEX® của chúng tôi cung cấp cho các nhà nghiên cứu khả năng định lượng đồng thời số lượng lớn các chất phân tích quan trọng để hiểu được đáp ứng miễn dịch ở người. Bảng Human Cytokine/Chemokine/Growth Factor Panel A 48 kênh tiết kiệm thời gian và thể tích mẫu để có được cái nhìn nhanh về hồ sơ chất phân tích trong cơn bão cytokine, nhiễm trùng huyết, và các giai đoạn bệnh lý khác.

Bảng kháng nguyên SARS-CoV-2 MILLIPLEX® của chúng tôi cho phép các nhà khoa học thực hiện các xét nghiệm IgM, IgG và IgA với mẫu máu, giúp phát hiện các mẫu đã tiếp xúc với SARS-CoV-2 và đã tạo một vài mức độ đáp ứng miễn dịch.  Bằng cách xét nghiệm đáp ứng của mỗi loại immunoglobulin chống lại các vùng kháng nguyên đặc hiệu của virus SARS-CoV-2, các nhà nghiên cứu có thể hiểu sâu hơn đáp ứng miễn dịch với virus, và khả năng đáp ứng miễn dịch tiềm năng của vaccine mRNA, trong suốt quá trình nhiễm và phục hồi từ COVID-19, hoặc tiêm chủng chống COVID-19.

Bảng kháng thể tự thân MILLIPLEX® Human autoantibody panel cung cấp phương thức định lượng đồng thời các kháng thể tự thân trong mẫu huyết tương và huyết thanh. Sự hiện diện của các kháng thể tự thân có thể đóng vai trò là chất chỉ thị cho nhiều loại bệnh miễn dịch tự miễn, như lupus ban đỏ hệ thống và hội chứng Sjögren. Các phát hiện gần đây cũng cho thấy việc sản sinh nhiều loại kháng thể tự thân liên quan tới bệnh truyền nhiễm, bao gồm COVID-19. Hồ sơ kháng thể tự thân có thể cho phép làm sáng tỏ thêm con đường miễn dịch liên quan đến nhiễm SARS-CoV-2 cấp tính và hiểu ảnh hưởng sau lây nhiễm.

Chúng tôi cung cấp một loạt các bảng MILLIPLEX® protein hòa tan và kit tín hiệu tế bào giúp làm sáng tỏ các con đường tín hiệu khi nghiên cứu đáp ứng miễn dịch với virus. Danh mục của chúng tôi cung cấp dải chất phân tích rộng nhất trên nhiều loài nhất, bao gồm các bảng về linh trưởng-không phải người cho nghiên cứu vaccine.

Tài liệu tham khảo

  1. Bradley, T, et al. Antibody Responses after a Single Dose of SARS-CoV-2 mRNA Vaccine. The New England Journal of Medicine, Correspondence March 23, 2021; doi: 10.1056/NEJMc2102051
  2. Huntington KE, et al. Cytokine ranking via mutual information algorithm correlates cytokine profiles with presenting disease severity in patients infected with SARS-CoV-2. eLife 2021;10:e64958. doi: https://doi.org/10.7554/eLife.64958
  3. Angioni R, et al. Age-severity matched cytokine profiling reveals specific signatures in COVID-19 patients. Cell Death Dis 11, 957 (2020). doi: https://doi.org/10.1038/s41419-020-03151-z
  4. Fraser DD, et al. Inflammation profiling in critically ill coronavirus disease 2019 patients. Crit Care Expl 2020; 2:e0144. doi: https://dx.doi. org/10.1097%2FCCE.0000000000000144
  5. Sasson JM, et al. Diverse Humoral Immune Responses in Younger and Older Adult COVID-19 Patients. medRxiv 2021.01.12.21249702; doi: https://doi.org/10.1101/2021.01.12.21249702
  6. Pierce CA, et al. Natural Mucosal Barriers and COVID-19 in Children. medRxiv 2021.02.12.21251310; doi: https://doi.org/10.1101/2021.02.12.21251310
  7. Young MK, et al. IgG Antibodies against SARS-CoV-2 Correlate with Days from Symptom Onset, Viral Load and IL-10. medRxiv 2020.12.05.20244541; doi: https://doi.org/10.1101/2020.12.05.202445417
  8. Munster V, et al. Respiratory disease in rhesus macaques inoculated with SARS-CoV-2. Nature 585, 268–272 (2020). doi: https://doi.org/10.1038/s41586-020-2324-7
  9. Bhadelia N, et al. Distinct Autoimmune Antibody Signatures Between Hospitalized Acute COVID-19 Patients, SARS-CoV-2 Convalescent Individuals, and Unexposed Pre-Pandemic Controls. medRxiv 2021.01.21.21249176; doi: https://doi.org/10.1101/2021.01.21.21249176
  10. Trahtemberg U, et al. COVID-19 associated autoimmunity is a feature of severe respiratory disease - a Bayesian analysis. medRxiv 2021.02.17.21251953; doi: https://doi.org/10.1101/2021.02.17.21251953

Để xem các ứng dụng của MILLIPLE® COVID-19 của Merck, hãy ghé thăm SigmaAldrich.com/milliplex-covid-19

Chỉ dùng trong nghiên cứu. Không sử dụng trong chẩn đoán.

Tải bản đầy đủ tại đây : PP-xet-nghiem-mien-dich-da-kenh-cho-nghien-cuu-COVID-19_flyer-1.pdf

Loader Loading...
EAD Logo Taking too long?

Reload Reload document
| Open Open in new tab

Tải Xuống [392.21 KB]

    NHẬN TIN MỚI QUA EMAIL